实施最慎重并且最适当的治疗
医院名古屋(医院)的ART(高度辅助生殖医疗)3、受精·培养常规体外受精是将数量适当的精子倾倒覆盖在卵子表面使其受精。如果活动镜子不能充分回收,或在以往的体外受精治疗中被判定为受精障碍而无法受精时,需要进行显微授精。受精卵发育顺利的话,在受精的第2天分裂为4细胞,第3天分裂为7~8细胞。将这个时期的胚胎(初期胚)进行移植时,就是初期胚移植。囊胚培养的情况是,受精卵在体外经过5~6天的培养,发育成为良好囊胚后就可以进行囊胚移植了。
常规体外受精是将数量适当的精子倾倒覆盖在卵子表面使其受精。当活动精子数量充分,并且以往没有特别受精障碍者,使用这种方法进行受精。
针对那些活动精子无法得到充分回收,或以往曾经有过体外受精经历的受精障碍者,实施显微授精。这是一种用人工方法将单一精子注射入卵泡浆内使其受精的方法。在实际操作中,使用一支极细的玻璃管吸引一支质量良好的精子并插入卵子中,然后将这只精子注射入卵泡浆内。※显微授精只是受精方法中的一种而已,只是因为卵子数量少,或很难怀孕等理由而进行显微授精是不必要的。如果通过体外受精可以确认到受精成功的话,那么显微授精是没有意义的。※显微授精的缺点是,在对细胞膜较薄弱的卵子进行显微授精时,由于玻璃管的插入引起损伤而无法受精的情况可能会发生。
在一般体外受精中,将精子和卵子在同一个培养皿中进行培养,次日清晨确认是否受精。在本院,受精当天(6个小时后)即确认是否发生受精现象。如果受精,会出现第二极体,以及卵细胞浆质的变化(受精锥,耀斑)也会出现。以上现象确认不到时则判断为没有受精,需要马上实施ICSI进行补救。
关于在体外受精当天进行ICSI补救后的妊娠率·着床率·流产率·产后综合症等问题的发生率,与常规体外受精相比完全没有任何不同。如果体外受精的当天不进行确认是否受精,次日清晨确认到没有受精后再去实施ICSI,也就是说,从体外受精后经过了20个小时后再去进行ICSI补救的话,那么,这时的卵子就会由于老化无法使用而引起妊娠率显著下降。因此,可以断定体外受精当天进行ICSI补救是一种非常创新的方式方法。
医院的显微授精,引进了压电式ICSI法。这种方法是通过注射针的平板玻璃管前端射出轻微的脉冲,将卵细胞膜打开一个小孔,再从小孔中将精子注射入卵子内的授精方法。这种方法使卵子承受的物理应力变得更小,目前已经取得了非常稳定的受精成果。
压电式ICSI。注射针的平板玻璃管前端部分射出轻微的脉冲,将卵细胞膜打开一个小孔。
传统的ICSI。使用尖头的玻璃管注射针刺破卵细胞后进行授精
选择活动性强,形态无异常的精子为ICSI使用。医院的IMSI是使用高倍率显微镜,扩大倍率后进行观察,确认是否在精子的头部、中段部位是否有空泡等异常情况后,再为ICSI所使用。
通常的ICSI,会将卵子的第一极体固定在12点或6点方向后进行授精。主要原因是考虑到纺锤体(纺锤体、包含染色体的亚细胞结构)会出现在这个第一极体的正下方。但实际上纺锤体也有可能存在于偏离第一极体的位置。(我们的研究表明,大约有25%的卵子,在距离第一极体30°以上的位置上确认到纺锤体的存在)使用普通显微镜来确认纺锤体是非常困难的,因此,由于ICSI的操作使纺锤体遭受损伤的情况可能也会发生。在医院,使用Polscope进行确认纺锤体。这是一种通过特殊的镜片和过滤器将纺锤体可视化,确认纺锤体的位置后再进行ICSI的方法,它有效地防止了纺锤体的破损。此外,无法清晰的确认到纺锤体,或卵子没有完全成熟的情况也可能发生。一般在这种情况发生时会花费1~2小时去等待卵子成熟后,再次确认纺锤体的位置,然后再进行ICSI。这种方式可以进一步提高受精率。不仅如此,目前医院正在研究,是否能够可以从纺锤体的有丝分裂状态,观测得到关于胚胎的发育速率·妊娠率·流产率·和产后综合征等相关信息(现在,医院使用Oosight?ImagingSystem、OCTAXpolarAIDE?、IX-Robopolar三种系统对纺锤体进行观察)
纺锤体的位置在第一极体正下方
纺锤体在偏离第一极体的位置
EmbryoScope?是一种配备了内置显微镜和摄像头的培养分析系统。可以每30分钟一次拍摄受精卵的发育状态,在无需将受精卵取出培养箱的情况下,也可以通过外置显示器监测培养状况。使用普通培养箱进行培养时,需要将受精卵取出后再使用显微镜进行观察,但使用时间推移培养箱(Time-lapse培养)进行培养时,受精卵既可以持续在培养器中培养,又能够满足观察检测的要求。有效地避免了受精卵需要被暴露在外部环境中的问题发生,并将被暴露时所受到的光线的变化、PH值的变化、温度的变化等种种刺激降低到最小限度。目前,医院认为这是一种「对卵子最温和的培养」方法。特别对于需要长期培养的囊胚培养,这是一种非常有效的培养方式。此外,在普通培养过程中一般大多数都需要一天进行一次观察检测,而使用时间推移培养箱的培养可以随时进行拍摄记录,从而使产生的信息量有了飞跃性的增加。拍摄的动态图像也使观察变得更方便,并且根据受精卵的动态解析,可以准确的实施选择质量更优良的受精卵。医院在年1月引进了2台EmbryoScope?培养分析系统,目前已经增加到9台,因此,已经基本上可以满足所有患者希望使用时间推移培养箱进行受精卵培养的要求。
如今,可以用视频观测到从胚胎细胞分裂到囊胚为止的整个培养过程。
将覆盖包裹在胚胎周围透明体削薄或切除一部分的操作。使胚胎能够更容易的脱出,让着床变得更容易。在医院使用安全性更高的激光技术进行辅助孵化。
初期胚的AHA将透明带削薄
囊胚的AHA将透明带的一部分切割
AHA后进行恢复培养,囊胚从被切割部分已经脱出一半时的状态
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